مقدمه:يكي از شاخصه هاي مهم درمان تشخيص صحيح و سريع عامل عفوني مي باشد.هم اكنون علم تشخيص جايگاه رفيعي در علم پزشكي پيدا كرده و ساليانه ميلياردها دلار سرمايه در جهت پيشرفت اين علم هزينه مي‌شود.در بيماريهاي عفوني دستيابي به تشخيص صحيح باعث مي‌شود كه درمان توسط پزشك به نحو مطلوبي انجام گيرد.كه نتيجه آن ارتقاء سطح بهداشت عمومي و از سوي ديگر اعتماد و اطمينان بيمار و پزشك به آزمايشگاه است.انواعي از بيماريهاي عفوني در انسان بوسيله ويروس ها ايجاد مي شوند، برخي از اين بيماريها فوق العاده كشنده بود، مثل هاري، هپاتيت، ايدز، تبهاي هموراژيك و انسفاليت و برخي هم ناراحتيهاي مختلفي در انسان ايجاد مي‌كنند مثل سرماخوردگي، اوريون، عفونت با هر ويروس ها برخي مثل سرخچه و سيتومگالو ويروس ها ناهنجاريهاي مادرزادي ايجاد مي‌كنند بالاخره بعضي از ويروس ها تومور و سرطان ايجاد مي‌كنند.شيوع روز افزون بيماري هاي ويروس اهميت و استفاده از روشهاي پيشرفته در تشخيص اين عوامل را بيش از پيش مطرح مي سازد.در سير تكامل شعب مختلف علوم پزشكي رشته ويروس شناسي نيز مستثني نبوده و پيوسته محققين آن در حال تكاپيو و تحقيق هستند كه حاصل تجربيات آنها راهنماي ما در يافتن روشهاي بهتر جهت تشخيص آزمايشگاهي بيماريهاي عفوني است.اين دفتر تحت عنوان مروري بر روشهاي ويروس شناسي با بررسي روشهاي معمول ويروس شناسي به علاقمندان اين رشته و دانشجويان علوم آزمايشگاهي و پزشكي تقديم مي‌گردد.لازم است قيد گردد اين كتاب طوري طراحي شده و تنظيم شده كه شخص علاقمند بايد با مقدمات اوليه ويروس آشنايي داشته باشد. تعداد صفحات 90 word مقدمهروشهای مختلف تشخیص آزمایشگاهی بیماریهای ویروسی برسه اصل استوار است۱-۱ جداسازی ویروس۱-۱- ب – جداکردن درکشت سلول ۱-۱-ج – کشت و جداکردن ویروس درحیوانات۲-۱- تشخیص بیماریهای ویروسی توسط آزمایشهای سرمی۳-۱- شناسایی بیماریهای ویروسی توسط آزمایشات ملکولیتاریخچه تلقیح به تخم مرغ جنین دار۲-۱- محاسن استفاده ازتخم مرغ جنین دار۲-۲ منبع تهیه تخم مرغ۳-۲ علائم رشد ویروس۴-۲ ساختمان تخم مرغ جنین دارداعمال غشاء الانتوئیک شامل:۵-۲ رشد جنین درسنین مختلف۶-۲ راههای تزریق۷-۲ موارد استعمال تخم مرغ جنین دار SPF درتشخیص ویروسهاالف-ویروسهائی که درتمام قسمتهای تخم مرغ جنین دار رشد می کنند.ب-ویروسهائی که روی پرده کوریوالانتوئیک رشد کرده و ایجاد جراحات شدید می کنند.ج-ویروسهائی که روی پرده کوریولاانتوئیک رشد کرده و ایجاد جراحات مختصر می کنند.د-ویروسهای که درروی پرده کوریوالانتوئیک رشد کرده و ایجاد جراحت نمی‌کنند.ه-ویروسهائی که درحفره الانتوئیک رشد می کنند.و-ویروسهائی که درحفره آمنیوتیک رشد می کنند .ی – ویروسهائی که درکیسه زرده رشد می کنند.۸-۲- روشهای مختلف کشت عوامل ویروسی درتخم مرغ جنین دار SPFمدمات تزریقوسایل موردنیاز شامل۹-۲ روش تزریق درحفره الانتوئیک۱۰-۲ روش تزریق درحفره آمینوتیکروش اولروش دومروش سوم۱۱-۲-تزریق در کیسه زرده۱۳-۲-برداشت مایعات و غشاء های آلوده به ویروس ازتخم مرغ جنین دار تزریق شده۳-کشت سلول Cell Culture1-3-مقدمه ای برکشت سلول۲-۳- موارد سودمند کشت سلول:۳-۳-مواردی که کشت سلول با اشکال مواجه می‌شود.۴-۳-کشت سلول اولیه Primary cell culture5-3-جدا نمودن نسج مورد استفاده جهت کشت سلول اولیه۶-۳-(تهیه کشت سلول اولیه به روش explant)7-3-تهیه سلول اولیه به روش آنزیمی۸-۳-هضم آنزیمی به روش تریپسین گرم۹-۳-هضم آنزیمی به روش تریپسین سرد۱۰-۳-استفاده از آنزیم های دیگر جهت هضم نسج11-3-هضم مکانیکی۱۲-۳-جداسازی سلولهای زنده و مرده۱۳-۲-کشت سلول ثانویه، دیپلوئید:۱۴-۳-هیستولوژی سلولهای دیپلوئید۱۵-۳-خصوصیات رشد۱۶-۳-منحنی رشد سلولهای دیپلوئید۱۷-۳-رابطه بین ظرفیت تکثیر و مادر سلول۱۸-۳-رابطه بین کشت سلولهای انسانی و سن(پدیده Hayflick)19-3-کشت سلول معلق Suspension cell culcutre۲۰-۳-روشهای کشت معلق:۲۱-۳-روش Selection۲۳-۳-عادت دادن یاخته به شرایط تعلیق Adaptation23-3-شرایط لازم برای انجام یک کشت معلق سلول24-3-خصوصیات محیط کشت سوسپانسیون: ۴ELISA -1-4-مزیت تکنیک ELISA:2-4-انواع روشهای ELISA:3-4-مراحل کار در ASILE 5-«ممانعت از هم اگلاتیناسیون»روش آزمایش:روش انجام آزمایش:۵-۶-آزمایش PCRآنزیم DNA Polymeraseداکسی نوکلئوتید تری فسفاتDNA الگوغلظت یون منیزیم (Mg+2)الف-اتصال پرایمرب-دمای تفکیک یا جداسازی DNAج-فعالیت آنزیم Taq DNA polymerase پرایمرهابافر PCR و کمک کننده هاسیکلهای PCRمرحله اتصالمرحله ساختتعداد سیکلسیستم های الکتروفورز