بررسي عفونت ريوي مايكوپلاسمايي ناشي از مايكوپلاسما مايكوئيدس واريته مايكوئيدس و مايكوپلاسما كاپري كولوم واريته كاپري كولوم در گوساله‌ها و بزهاي كشتارش

دانلود

عنوان پایان نامه: بررسي عفونت ريوي مايكوپلاسمايي ناشي از مايكوپلاسما مايكوئيدس واريته مايكوئيدس و مايكوپلاسما كاپري كولوم واريته كاپري كولوم در گوساله‌ها و بزهاي كشتارشده به روش PCR
فرمت فایل: word
تعداد صفحات: 178
شرح مختصر:
كلاستر مايكوپلاسما مايكوئيدس در برگيرنده مهمترين پاتوژنهاي تنفسي نشخواركنندگان است كه ساليانه، خسارات اقتصادي سنگيني بر صنعت دامپروري كشورهاي جهان وارد مي‌كند. اخيرا شيوعهاي بازپديدي از عفونتهاي پلوروپنوموني نشخواركنندگان در منطقه خاورميانه گزارش شده است. در اين شرايط تعيين وضعيت گله‌هاي كشور از نظر آلودگي به گونه‌هاي پاتوژن اين كلاستر، از اهميت خاصي برخوردار است. هنوز گزارشي از شناسايي و جداسازي گونه‌هاي درگير از عفونت پلوروپنوموني در ايران بدست نيامده است. عدم برخورداري از خصوصيت پاتوگونوميك در نمونه‌هاي باليني و دشواريهاي فراوان جداسازي ميكروارگانيسم، به ضرورت شناسايي و بكارگيري روشهاي تشخيصي جايگزين افزوده است.
علاوه بر اين، دستيابي به روشي كاربردي و سريع، در تشخيص عفونتهاي تنفسي گله‌ها و تخميني از وضعيت عفونت در ايران، مدنظر اين تحقيق بوده است.
در اين مطالعه‌، 100 نمونه ريه با ضايعات مشكوك به عفونتهاي تنفسي مايكوپلاسمايي از 100 گله مشكوك (50 گله گاو،30 گله گوسفند،20 گله بز) در اطراف كرمانشاه ، در سالهاي 1386-1384 جمع آوري شدند. ضايعات ماکروسکوپي شامل کبدي شدن ريه‌ها با زخم‌هاي خاکستري و سفيد(جامد شدن) و ظاهر منقوط با يا بدون فيبرين بودند. نمونه‌ها در محيط کشت PPLO براث و آگار کشت داده شدند.پس از پاساژهاي متعدد،از 23 گله مشکوک،تک کلوني تخم‌مرغي شکل مايکوپلاسما جداشد(11 گله گاو،8 گله گوسفند،4 گله بز).
امادر واكنش, PCR63 گله عفونت مايكوپلاسماي تنفسي نشان دادند (37 گله گاو، 17 گله گوسفند، 9 گله بز).
اين امر، مبين اين نكته است كه عليرغم اينكه جداشدن عامل مايكوپلاسمايي از نمونه‌ها در محيط كشت، اساس تعيين وضعيت عفونت‌هاي مايكوپلاسمايي قلمداد مي‌شود، اما سخت‌رشد بودن گونه‌هاي مورد مطالعه در محيط كشت و عدم دستيابي سريع به نتيجه، كارآيي اين روش تشخيصي را در پايش متداول عفونت گله‌ها زير سوال برده است.
علاوه بر اين، بكاربردن آنتي بيوتيكهاي متنوع در دوره درمان و از بين رفتن ميكروارگانيسم در خلال جمع آوري نمونه، ‌نتايج رشد در محيط كشت مايكوپلاسما را دستخوش تغيير داده است.
از اين رو،‌ استفاده از روشهاي مولكولي PCR بعنوان يك روش كاربردي، حساس و سريع توصيه مي‌شود. پس از استخراج ‌DNA نمونه‌ها به روش فنل کلروفورم و جدا كردن نمونه‌هاي آلوده به مايكوپلاسما از طريق PCR ، با استفاده از پرايمر اختصاصي كلاستر مايكوئيدس نمونه‌هاي مايكوپلاسمايي تحت واكنش PCR قرار گرفتند.
باند bp 548، تنها در نمونه كنترل ( سويه F38) ديده شد. به منظور كنترل روند واكنش، نمونه‌ها با پرايمر اختصاصي مايكوئيدس كلوني بزرگ و پرايمر اختصاصي آگالاكتيه، به طور جداگانه PCR شدند كه نتيجه اين آزمايش، يافته‌هاي آزمايش قبلي را تائيد مي‌كرد.
اگر چه اين تحقيق نشان داد كه عامل عفونتهاي تنفسي مشكوك در نمونه‌هاي مورد مطالعه نمي‌تواند از گونه‌هاي كلاستر مايكوئيدس باشد، منتهي تخمين ميزان عفونت در گله‌هاي مورد مطالعه، احتياج به تحقيقات وسيعتر با جمع‌آوري تعداد نمونه‌هاي بيشتر در مطالعات بعدي دارد
فهرست مطالب
الف- مقدمه1
ب-چکيده3
فصل اول:کليات 5
1- تاريخچه 6
2- خصوصيات کلي مايکوپلاسما6
3- مقاومت مايکوپلاسماها 8
4- طبقه بندي مايکوپلاسماها 9
5- طبقه بندي کلاستر مايکوئيدس12
6- فيلوژني14
7- ساختمان 15
1-7-ساختمان مايکوپلاسما مايکوئيدس15
2-7- ساختمان مايکوپلاسما کاپري کولوم 17
8- بيولوژي مولکولي19
9- توالي‌هاي تکراري23
10- پروتئينهاي سطحي25
11- فاکتور حدت30
12- آناليز پروتئين 32
13- طبقه بندي سويه‌ها 34
14- مشخصات گونه مايکوئيدس35
15- کشت و رشد گونه مايکوئيدس 38
16- کشت و رشد گونه کاپري کولوم 41
1-16- محيط Thiacourt 41
17- بيماري پلوروپنوموني واگير گاوان44
1-17- علائم باليني 45
2-17- علائم کالبدگشايي بيماري 47
3-17- پاتوژنز 50
1-3-17- مکانيسمهاي مقابله با دستگاه ايمني53
4-17- اختصاصيت ميزبان57
5-17- انتقال بيماري 58
6-17- سير همه گيري 59
1-6-17- مخزن59
2-6-17- راه انتقال59
7-17- پيشگيري و کنترل60
1-7-17- اقدامات لازم براي حفاظت مناطق عاري از بيماري61
2-7-17- اقدامات لازم هنگام شيوع بيماري62
3-7-17- اقدامات لازم در مناطق آلوده بومي63
18- بيماري پلوروپنوموني واگير بزان 63
1-18- علائم باليني 64
2-18- علائم کالبد گشايي66
19- گونه مايکوپلاسما کاپريکولوم کاپريکولوم69
1-19- سندروم MASKePs...................................70
2-19- علائم باليني71
3-19- علائم کالبد گشايي71
4-19- سندروم آگالاکتيه واگير73
20- گونه مايکوپلاسما کاپري 73
1-20- بيماريزايي 73
2-20- علائم کالبد گشايي74
21- سير همه‌گيري75
1-21-مخزن 75
2-21-راه انتقال76
3-21-جمعيت ميزبان77
22-پيشگيري وکنترل77
1-22- اقدامات لازم براي محافظت مناطق عاري از بيماري77
2-22- اقدامات لازم هنگام شيوع بيماري78
3-22- اقدامات لازم در مناطق آلوده بومي78
23-واکسن79
1-23-واکسن MmmLC 79
2-23-واکسن Mccp 79
3-23-واکسن Mcc 79 79-اختصاصيت ميزبان در کلاستر مايکوئيدس 80
25-تشخيص افتراقي80
1-25-شناسايي عامل بيماري زا81
1-1-25-بررسي ميکروسکوپيک اگزوداي ريه از طريق تهيه اسمير يا برش بافتي 81
2-25- تشخيص آزمايشگاهي 81
1-2-25- روش کشت و جداسازي81
1-1-2-25- انتخاب نمونه ها 82
2-1-2-25- آماده سازي نمونه ها 82
3-25- تستهاي بيوشيمي83
4-25- روشهاي سرولوژي85
1-4-25- عوامل موثر در آزمايشات سرولوژي 85
2-4-25- تست مهاري رشد 87
3-4-25- تست ايمونو فلورسانس 88
4-4-25- تست رسوب ژلي 88
5-4-25- تست فيکساسيون کامپلمان 89
6-4-25- تست ممانعت از هماگلوتيناسيون89
7-4-25- تست آگلوتيناسيون لاتکس90
8-4-25- تست اليزاي رقابتي91
9-4-25- ساير تستهاي تشخيصي 94
5-25 - مشکلات روشهاي سنتي94
6-25- تشخيص با استفاده از PCR95
فصل دوم: روش کار
26- روش کار 101
1-26- جمع آوري نمونه101
1-1-26- مواد لازم101
2-1-26- بخش جمع آوري نمونه101
3-1-26- نمونه برداري103
2-26- کشت و جداسازي نمونه ها104
1-2-26- مواد لازم 104
2-2-26- طرز تهيه محيط کشت اختصاصي براي جداسازي مايکوپلاسماي نشخوار کنندگان 106
1-2-2-26- مواد لازم 106
2-2-2-26- روش تهيه محيط کشت107
3-26- استخراج DNA مايکوپلاسما109
1-3-26- روش استخراج DNA از نمونه هاي ارسالي109
4-26- فرايند PCR 110
1-4-26- مواد لازم 110
2-4-26- آماده سازي مواد جهت واکنش PCR112
1-2-4-26- افزوده سازي DNA نمونه‌ها 112
2-2-4-26- افزوده سازي DNA کلونيهاي جدا شده115
3-2-4-26- تهيه مخلوط اصلي اوليه115
3-4-26- پرايمرها115
4-26- واکنشPCR.................
5-26- تهيه ژل الکتروفورز 118
1-5-26- طرز تهيه محلول اتيديوم برمايد119
6-26- الکتروفورز121
7-26- رويت باندهاي ايجاد شده 122
فصل سوم: نتايج
27- نتايج 124
1-27- جداسازي124
1-1-27- بررسي عملکرد محيط کشت124
2-1-27- نتايج کشت نمونه هاي ارسالي 124
1-2-1-27- نتايج روز پنجم 125
2-2-1-27- نتايج روزهفتم تا دهم125
3-2-1-27- نتايج روزپانزدهم126
2-27- نتايج PCR 126
1-2-27- نتايج PCR نمونه ها با پرايمر جنس 126
2-2-27- تائيد کلوني هاي جدا شده127
3-2-27- نتايج PCR نمونه ها با پرايمر کلاستر مايکوئيدس127
4-2-27- نتايج PCR نمونه ها با پرايمر گونه آگالاکتيه128
5-2-27- نتايج PCR نمونه ها با پرايمر گونه مايکوئيدس کلوني بزرگ129
3-27- نتايج کالبد گشايي130
1-3-27- معيار انتخاب 130
فصل چهارم: بررسي نتايج
نمودارها 131
فصل پنجم: بحث
28- بحث 139
1-28- ضايعات کالبد گشايي139
2-28- ميزان وقوع عفونت تنفسي مايکوپلاسما 141
3-28- روش کشت142
4-28- روش PCR 147
5-28- فراواني گونه ها 152
29- خلاصه انگليسي159
30- منابع 160
فهرست تصاوير
 تصوير شماره 1: کلوني تخم مرغي شکل مايکوپلاسما پس از سومين ساب کالچر 125
تصوير شماره 2: آزمايش PCR براي تشخيص جنس مايکوپلاسما در نمونه ريه127
تصوير شماره 3: آزمايش PCR براي تشخيص کلاستر مايکوئيدس در نمونه ريه128
تصوير شماره 4: آزمايش PCR براي تشخيص گونه آگالاکتيه درنمونه ريه..... 129
تصوير شماره 5: آزمايش PCR براي تشخيص گونه مايکوئيدس مايکوئيدس کلوني بزرگ 130
فهرست جداول
 جدول1: طبقه بندي مايکوپلاسما 11
جدول 2: معرفي اعضا کلاستر مايکوئيدس و خصوصيات بيماريزايي آنها 11
جدول 3: احتياجات غذايي براي رشد مايکوپلاسماهاي کلاستر مايکوئيدس............. 39
جدول 4 : مقادير موردنياز جهت تهيه مخلوط اصلي اوليه112
جدول 5: مواد مورد نياز واکنش تکثير 114
جدول6 : پرايمرهاي استفاده شده در واکنش تکثير 116
جدول 7 : برنامه واکنش پرايمرها 118
جدول8: : فرمول تهيه محيط TBE(5X).......................... 120
جدول9: ميزان اتيديوم برومايد مصرفي جهت ساختن مقادير متفاوت ژل120
فهرست نمودارها
نمودار شماره 1: درصد مايکوپلاسماي جدا شده به روش کشت در عفونت تنفسي
گله‌هاي مورد مطالعه132
نمودارشماره 2: درصد حضور مايکوپلاسما درعفونت تنفسي گله‌هاي مورد
مطالعه به روشPCR 132
نمودار شماره3 : مقايسه روشهاي کشت و PCR در تشخيص مايکوپلاسما ي موجود در عفونت تنفسي گله‌هاي مورد مطالعه.......................... 133
نمودار شماره4: مقايسه نتايج کشت وPCR نمونه‌ها در گله‌هاي مورد مطالعه (n=100) 133
نمودار شماره 5: مقايسه نتايج کشت و PCR مايکوپلاسما در گاو (n=50) ...... 134
نمودار شماره 6: مقايسه نتايج کشت و PCR مايکوپلاسما در گله هاي گوسفند (n=30) 134
نمودار شماره 7: مقايسه نتايج کشت و PCR در گله‌هاي بز (n=20).................. 135
نمودار شماره8: نمودار شماره 8:مقايسه نتايج تشکيل کدورت در محيط براث و PCR مايکوپلاسما در گله‌هاي مورد مطالعه (n=100) ........... 135
نمودار شماره 9: نمودار شماره9:مقايسه نتايج ايجاد کدورت در محيط براث و جداسازي مايکوپلاسما در گله‌هاي مورد مطالعه (n=100) ........... 136
نمودار شماره 10: نمودار شماره10: مقايسه نتايج تشکيل کدورت در محيط براث و PCR مايکوپلاسما در گله‌هاي گاو(n=50)...............................136
نمودار شماره 11: نمودار شماره 11:مقايسه نتايج تشکيل کدورت در محيط براث و PCR مايکوپلاسما در گله‌هاي بز (n=20)............................................. 137
نمودار شماره12: مقايسه نتايج تشکيل کدورت در محيط براث و PCR مايکوپلاسما در گله‌هاي گوسفند (n=30) ..................................... 137

👇 تصادفی👇

شیپ فایل کل گسلها و گسلهای فعال و کواترنری استان کردستاندانلود مقاله کاشت، داشت، برداشت و خواص بادام324-تحلیل ساختار جریان آشفته ایجاد شده در پایین دست پله تحت شرایط هیدرولیکی مختلفدانلود کتاب داستان خوانی انگلیسیپروژه کار آفرینی تولید و مونتاژ تابلوهای برق فشار قوی و ضعیفپاور پوینت مرکز تجاری غرب اوزاکافایل stl پروژه10بررسی مطالعات صورت گرفته در زمینه جبران ساز سنکرون استاتیک (SSSC) ✅فایل های دیگر✅

#️⃣ برچسب های فایل بررسي عفونت ريوي مايكوپلاسمايي ناشي از مايكوپلاسما مايكوئيدس واريته مايكوئيدس و مايكوپلاسما كاپري كولوم واريته كاپري كولوم در گوساله‌ها و بزهاي كشتارش

بررسي عفونت ريوي مايكوپلاسمايي ناشي از مايكوپلاسما مايكوئيدس واريته مايكوئيدس و مايكوپلاسما كاپري كولوم واريته كاپري كولوم در گوساله‌ها و بزهاي كشتارش

دانلود بررسي عفونت ريوي مايكوپلاسمايي ناشي از مايكوپلاسما مايكوئيدس واريته مايكوئيدس و مايكوپلاسما كاپري كولوم واريته كاپري كولوم در گوساله‌ها و بزهاي كشتارش

خرید اینترنتی بررسي عفونت ريوي مايكوپلاسمايي ناشي از مايكوپلاسما مايكوئيدس واريته مايكوئيدس و مايكوپلاسما كاپري كولوم واريته كاپري كولوم در گوساله‌ها و بزهاي كشتارش

👇🏞 تصاویر 🏞