دانلود پایان نامه بررسي عفونت ريوي مايكوپلاسمايي ناشي از مايكوپلاسما مايكوئيدس واريته مايكوئيدس و مايكوپلاسما كاپري كولوم واريته كاپري كولوم در گوساله

دانلود

عفونت پلوروپنوموني واگير،‌ بيماري تحليل برنده تنفسي است كه با جاي گرفتن در طبقه‌بندي بيماريهاي سازمان جهاني كنترل بيماريهاي واگير، لزوم و اهميت شناسايي آن مشخص شده است. عامل اصلي اين بيماري، گونه مايكوپلاسما مايكوئيدس مي‌باشد كه تايپ كلوني كوچك آن[1] بطور اختصاصي به گله‌هاي گاو، خسارات فراواني ناشي از همه‌گيري گسترده و مرگ و مير فراوان تحميل كرده است.
تايپ كلوني بزرگ اين گونه[2] همراه با دو گونه ديگر بنامهاي مايكوپلاسما كاپري كولوم كاپري كولوم[3]و مايكوپلاسما مايكوئيدس كاپري[4]فرم غيركلاسيك پلوروپنوموني واگير را در گله‌هاي گوسفند و بز بوجود آورده‌اند. اين بيماري در فرم كلاسيك، که عامل آن مايکوپلاسما کاپري کولوم کاپري پنوموني[5] شناخته مي‌شود، خسارات اقتصادي سهمگيني در گله‌هاي بز و گوسفند موجب گرديده است.
از آنجائيكه منطقه خاورميانه جزو مناطق مشكوك به آلودگي پلوروپنوموني واگير محسوب مي‌شود، حفظ وضعيت عاري بودن از عفونت در اين منطقه، مشكل يا تقريبا غيرممكن بوده و نيازمند بازنگري درراهبردهاي بكار رفته به منظور تشخيص و كنترل اين عفونت‌هاست. عدم برخورداري از خصوصيت پاتوگونوميك تشخيصي و پاتولوژيكي‌، مسير بيماريزايي ناشناخته و تنوع فنوتيپي بسيار پيچيده ارگانيسم در مواجهه با دستگاه ايمني ميزبان، بر مشكل شناسايي آن افزوده است. علاوه بر اين ، ابقا طولاني مدت باکتري در محل عفونت و وجود ناقلين بدون علامت‌، برنامه كنترل بيماري را با چالش روبرو كرده است.
از اين رو، شناسايي و بكارگيري روشهاي تشخيصي و تفريقي گونه‌هاي كلاستر مايكوپلاسما مايكوئيدس كه هركدام استراتژي جداگانه اي در برخورد با عفونت گله‌ها دارند، از اهميت ويژه‌اي برخوردار است.
از آنجايي كه مايكوپلاسماهاي پاتوژن در محيط كشت به سختي رشد مي‌كنند، استفاده متداول از روش كشت و جداسازي، شناسايي عفونت گله‌ها را با مشكل روبرو كرده است.
از طرف ديگر، عمدتا به دليل تشابه آنتي ژنتيكي بين گونه‌هاي كلاسترمايكوئيدس و ساير گونه‌هاي مايكوپلاسما، روشهاي سرولوژي از دقت و ويژگي كافي در تمايز گونه‌ها برخوردار نيستند. لذا به رهيافت روش‌هاي مولكولي مانندPCR بعنوان روشي سريع، دقيق و با حساسيت و ويژگي مطلوب در كنترل عفونت گله‌ها، توجه ويژه‌اي مي‌شود.
هدف از اين مطالعه، بررسي عفونت‌هاي تنفسي ناشي از كلاستر مايكوئيدس در گله‌هاي نشخواركنندگان از طريق كشت و PCR مي‌باشد.
عنوان ................................................................................................... صفحه
الف- مقدمه.............................................. 1
ب-چکيده................................................. 3
فصل اول:کليات .......................................... 5
1- تاريخچه .......................................... 6
2- خصوصيات کلي مايکوپلاسما............................... 6
3- مقاومت مايکوپلاسماها................................. 8
4- طبقه بندي مايکوپلاسماها.............................. 9
5- طبقه بندي کلاستر مايکوئيدس........................... 12
6- فيلوژني............................................. . 14
7- ساختمان ........................................... 15
1-7-ساختمان مايکوپلاسما مايکوئيدس ........................ 15
2-7- ساختمان مايکوپلاسما کاپري کولوم ................... 17
8- بيولوژي مولکولي..................................... 19
9- توالي‌هاي تکراري..................................... 23
10- پروتئينهاي سطحي.................................... 25
11- فاکتور حدت......................................... 30
12- آناليز پروتئين ................................... 32
13- طبقه بندي سويه‌ها .................................. 34
14- مشخصات گونه مايکوئيدس.............................. 35
15- کشت و رشد گونه مايکوئيدس .......................... 38
16- کشت و رشد گونه کاپري کولوم ........................ 41
1-16- محيط Thiacourt .................................... 41
17- بيماري پلوروپنوموني واگير گاوان.................... 44
1-17- علائم باليني ...................................... 45
2-17- علائم کالبدگشايي بيماري ........................... 47
3-17- پاتوژنز .......................................... 50
1-3-17- مکانيسمهاي مقابله با دستگاه ايمني............... 53
4-17- اختصاصيت ميزبان................................... 57
5-17- انتقال بيماري ................................... 58
6-17- سير همه گيري ..................................... 59
 
فهرست
عنوان صفحه
1-6-17- مخزن............................................ 59
2-6-17- راه انتقال...................................... 59
7-17- پيشگيري و کنترل................................... 60
1-7-17- اقدامات لازم براي حفاظت مناطق عاري از بيماري..... 61
2-7-17- اقدامات لازم هنگام شيوع بيماري................... 62
3-7-17- اقدامات لازم در مناطق آلوده بومي................. 63
18- بيماري پلوروپنوموني واگير بزان .................... 63
1-18- علائم باليني ...................................... 64
2-18- علائم کالبد گشايي.................................. 66
19- گونه مايکوپلاسما کاپريکولوم کاپريکولوم.............. 69
1-19- سندروم MASKePs................................... 70
2-19- علائم باليني....................................... 71
3-19- علائم کالبد گشايي.................................. 71
4-19- سندروم آگالاکتيه واگير............................. 73
20- گونه مايکوپلاسما کاپري ............................. 73
1-20- بيماريزايي ....................................... 73
2-20- علائم کالبد گشايي.................................. 74
21- سير همه‌گيري....................................... 75
1-21-مخزن............................................. .. 75
2-21-راه انتقال....................................... 76
3-21-جمعيت ميزبان..................................... 77
22-پيشگيري وکنترل .................................... 77
1-22- اقدامات لازم براي محافظت مناطق عاري از بيماري.... 77
2-22- اقدامات لازم هنگام شيوع بيماري................... 78
3-22- اقدامات لازم در مناطق آلوده بومي................. 78
23-واکسن................................................. 79
1-23-واکسن MmmLC .................................... 79
2-23-واکسن Mccp ....................................... 79
3-23-واکسن Mcc ....................................... 7979-اختصاصيت ميزبان در کلاستر مايکوئيدس .................. ....... 80
 
 
فهرست
 
عنوان ........................................................................................................... صفحه
 
25-تشخيص افتراقي...................................... 80
1-25-شناسايي عامل بيماري زا .......................... .. 81
1-1-25-بررسي ميکروسکوپيک اگزوداي ريه از طريق تهيه اسمير يا برش بافتي 81
2-25- تشخيص آزمايشگاهي ............................... 81
1-2-25- روش کشت و جداسازي.............................. 81
1-1-2-25- انتخاب نمونه ها ................................ 82
2-1-2-25- آماده سازي نمونه ها ......................... 82
3-25- تستهاي بيوشيمي.................................. 83
4-25- روشهاي سرولوژي.................................. 85
1-4-25- عوامل موثر در آزمايشات سرولوژي .................. 85
2-4-25- تست مهاري رشد .................................. 87
3-4-25- تست ايمونو فلورسانس ............................. 88
4-4-25- تست رسوب ژلي................................... .. 88
5-4-25- تست فيکساسيون کامپلمان .......................... 89
6-4-25- تست ممانعت از هماگلوتيناسيون .................... 89
7-4-25- تست آگلوتيناسيون لاتکس.......................... 90
8-4-25- تست اليزاي رقابتي.............................. 91
9-4-25- ساير تستهاي تشخيصي............................. 94
5-25 - مشکلات روشهاي سنتي.............................. 94
6-25- تشخيص با استفاده از PCR......................... 95
فصل دوم: روش کار
26- روش کار .......................................... 101
1-26- جمع آوري نمونه .................................... 101
1-1-26- مواد لازم......................................... 101
2-1-26- بخش جمع آوري نمونه............................. 101
3-1-26- نمونه برداري.................................. 103
2-26- کشت و جداسازي نمونه ها........................... 104
1-2-26- مواد لازم ...................................... 104
 
 
 
فهرست
عنوان ........................................................................................................... صفحه
2-2-26- طرز تهيه محيط کشت اختصاصي براي جداسازي مايکوپلاسماي نشخوار کنندگان 106
1-2-2-26- مواد لازم .................................... 106
2-2-2-26- روش تهيه محيط کشت............................... 107
3-26- استخراج DNA مايکوپلاسما.......................... 109
1-3-26- روش استخراج DNA از نمونه هاي ارسالي.............. 109
4-26- فرايند PCR..................................... 110
1-4-26- مواد لازم ...................................... 110
2-4-26- آماده سازي مواد جهت واکنش PCR ................... 112
1-2-4-26- افزوده سازي DNA نمونه‌ها .................... 112
2-2-4-26- افزوده سازي DNA کلونيهاي جدا شده............ 115
3-2-4-26- تهيه مخلوط اصلي اوليه........................ 115
3-4-26- پرايمرها....................................... 115
4-26- واکنش PCR....................................... 117
5-26- تهيه ژل الکتروفورز ............................. 118
1-5-26- طرز تهيه محلول اتيديوم برمايد ................... 119
6-26- الکتروفورز ........................................ 121
7-26- رويت باندهاي ايجاد شده ......................... 122
 
فصل سوم: نتايج
27- نتايج ............................................ .. 124
1-27- جداسازي......................................... 124
1-1-27- بررسي عملکرد محيط کشت.......................... 124
2-1-27- نتايج کشت نمونه هاي ارسالي .................... 124
1-2-1-27- نتايج روز پنجم ............................. 125
2-2-1-27- نتايج روزهفتم تا دهم......................... 125
3-2-1-27- نتايج روزپانزدهم............................. 126
2-27- نتايج PCR ....................................... 126
1-2-27- نتايج PCR نمونه ها با پرايمر جنس ............ 126
2-2-27- تائيد کلوني هاي جدا شده........................ 127
3-2-27- نتايج PCR نمونه ها با پرايمر کلاستر مايکوئيدس. 127
4-2-27- نتايج PCR نمونه ها با پرايمر گونه آگالاکتيه... 128
5-2-27- نتايج PCR نمونه ها با پرايمر گونه مايکوئيدس کلوني بزرگ 129
3-27- نتايج کالبد گشايي............................... 130
1-3-27- معيار انتخاب .................................. 130
 
 
فهرست
عنوان صفحه
فصل چهارم: بررسي نتايج
نمودارها................................................. 131
فصل پنجم: بحث
28- بحث ................................................. 139
1-28- ضايعات کالبد گشايي................................. 139
2-28- ميزان وقوع عفونت تنفسي مايکوپلاسما .............. 141
3-28- روش کشت......................................... 142
4-28- روش PCR ....................................... 147
5-28- فراواني گونه ها ................................ 152
29- خلاصه انگليسي...................................... 159
30- منابع ............................................ .. 160
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
فهرست تصاوير
عنوان .......................................................................................................................... صفحه
 
تصوير شماره 1: کلوني تخم مرغي شکل مايکوپلاسما پس از سومين ساب کالچر 125
 
تصوير شماره 2:آزمايش PCR براي تشخيص جنس مايکوپلاسما در نمونه ريه 127
 
تصوير شماره 3:آزمايش PCR براي تشخيص کلاستر مايکوئيدس در نمونه ريه 128
 
تصوير شماره 4:آزمايش PCR براي تشخيص گونه آگالاکتيه درنمونه ريه ............................................. ............................................. ............................................. ............................................. 129
تصوير شماره 5:آزمايش PCR براي تشخيص گونه مايکوئيدس مايکوئيدس کلوني بزرگ 130
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
فهرست جداول
عنوان .......................................................................................................................... صفحه
جدول1: طبقه بندي مايکوپلاسما............................. 11
جدول 2: معرفي اعضا کلاستر مايکوئيدس و خصوصيات بيماريزايي آنها 11
جدول 3: احتياجات غذايي براي رشد مايکوپلاسماهاي کلاستر مايکوئيدس 39
جدول 4 : مقادير موردنياز جهت تهيه مخلوط اصلي اوليه.... 112
جدول 5: مواد مورد نياز واکنش تکثير ................... 114
جدول6 : پرايمرهاي استفاده شده در واکنش تکثير ......... 116
جدول 7 : برنامه واکنش پرايمرها ....................... 118
جدول8: : فرمول تهيه محيط TBE(5X)...................... 120
جدول9: ميزان اتيديوم برومايد مصرفي جهت ساختن مقادير متفاوت ژل 120
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
فهرست نمودارها
عنوان ..................................................................................................................................... صفحه
نمودار شماره 1: درصد مايکوپلاسماي جدا شده به روش کشت در عفونت تنفسي
گله‌هاي مورد مطالعه.................................. 132
نمودارشماره 2: درصد حضور مايکوپلاسما درعفونت تنفسي گله‌هاي مورد
مطالعه به روشPCR ................................... 132
نمودار شماره3 : مقايسه روشهاي کشت و PCR در تشخيص مايکوپلاسما ي موجود در عفونت تنفسي گله‌هاي مورد مطالعه...................... 133
نمودار شماره4: مقايسه نتايج کشت وPCR نمونه‌ها در گله‌هاي مورد مطالعه (n=100) 133
نمودار شماره 5: مقايسه نتايج کشت و PCR مايکوپلاسما در گاو (n=50) 134
نمودار شماره 6: مقايسه نتايج کشت و PCR مايکوپلاسما در گله هاي گوسفند (n=30) 134
نمودار شماره 7: مقايسه نتايج کشت و PCR در گله‌هاي بز (n=20) 135
نمودار شماره8: نمودار شماره 8:مقايسه نتايج تشکيل کدورت در محيط براث و PCR مايکوپلاسما در گله‌هاي مورد مطالعه (n=100) ............ 135
نمودار شماره 9: نمودار شماره9:مقايسه نتايج ايجاد کدورت در محيط براث و جداسازي مايکوپلاسما در گله‌هاي مورد مطالعه (n=100) .... 136
نمودار شماره 10:نمودار شماره10: مقايسه نتايج تشکيل کدورت در محيط براث و PCR مايکوپلاسما در گله‌هاي گاو(n=50).................................. 136
نمودار شماره 11:نمودار شماره 11:مقايسه نتايج تشکيل کدورت در محيط براث و PCR مايکوپلاسما در گله‌هاي بز (n=20).................................. 137
نمودار شماره12: مقايسه نتايج تشکيل کدورت در محيط براث و PCR مايکوپلاسما در گله‌هاي گوسفند (n=30) ............................... 137
شامل 223 صفحه فایل word قابل ویرایش

👇 تصادفی👇

جام جهانی در جوادیه+دانلود pdf کتاب جام جهانی در جوادیهمعرفی مجتمع تجاری پارادا در شهر توکیوبررسی رابطه بین سبک های رهبری مدیران و کارائی کارکنانمدلسازی یکسوساز سه فاز نیم موج کنترل شده در نرم افزار متلبپايان نامه مراحل تحليل ديناميكي شاتون به روش اجزاي محدودRing 10شکنجه و امید.احسان طبریدانلود پایان نامه برد ارتباطی USB ، Wifi ، SMS و BlueTooth‎ ✅فایل های دیگر✅

#️⃣ برچسب های فایل دانلود پایان نامه بررسي عفونت ريوي مايكوپلاسمايي ناشي از مايكوپلاسما مايكوئيدس واريته مايكوئيدس و مايكوپلاسما كاپري كولوم واريته كاپري كولوم در گوساله

دانلود پایان نامه بررسي عفونت ريوي مايكوپلاسمايي ناشي از مايكوپلاسما مايكوئيدس واريته مايكوئيدس و مايكوپلاسما كاپري كولوم واريته كاپري كولوم در گوساله

دانلود دانلود پایان نامه بررسي عفونت ريوي مايكوپلاسمايي ناشي از مايكوپلاسما مايكوئيدس واريته مايكوئيدس و مايكوپلاسما كاپري كولوم واريته كاپري كولوم در گوساله

خرید اینترنتی دانلود پایان نامه بررسي عفونت ريوي مايكوپلاسمايي ناشي از مايكوپلاسما مايكوئيدس واريته مايكوئيدس و مايكوپلاسما كاپري كولوم واريته كاپري كولوم در گوساله

👇🏞 تصاویر 🏞